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芝麻源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū)
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4335
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-07-17
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4335
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
純度 %
規格 50T
是否進(jìn)口

客戶(hù)只需提供樣品和待檢測名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗以及后續數據分析,提供實(shí)驗報告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

貨號

芝麻源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū)

50T

LZR4335

PCR實(shí)驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線(xiàn);

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線(xiàn)計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線(xiàn)。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線(xiàn)法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線(xiàn)計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:

球型芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus sphaericus Meyer et Neide

毛栓孔菌拉丁屬名: Trametes hirsuta

醬油  氨基酸態(tài)氮、氯化鈉、三氯蔗糖拉丁屬名: 醬油  氨基酸態(tài)氮、氯化鈉、三氯蔗糖

紡錘雷素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces netropsis

異常漢遜酵母拉丁屬名: Hansenula  anomala

大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮

黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger

米根霉拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

蘇云金芽孢桿菌用途: 害蟲(chóng)生物防治

蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

枯草芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應用等非醫療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

膠紅酵母拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa

根瘤菌用途: 固氮

黃硬皮馬勃用途: 外生菌根菌
芝麻源性成分探針?lè )晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)A2BP1 英文名稱(chēng): 蛋白2結合蛋白1 0.2ml

Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 小鼠eMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELAVL1/HuR ELAVL1 規格 0.2ml

I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T

MTLR 英文名稱(chēng): 胃動(dòng)素受體 0.1ml

CDC42EP3 英文名稱(chēng): CDC42效應蛋白3 0.1ml

Anti-Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) 磷酸化蛋白激酶MSTMulti-class antibodies規格: 0.1ml

T(Human Testoterone) ELISA Kit 人睪酮Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-LTB4-R1 白三烯B4受體1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Kiss 1/Kisspeptin 轉移抑制基因 規格 0.1ml

FT4 ELISA Kit 大鼠游離甲狀腺素 96T

PCGF1 英文名稱(chēng): 表觀(guān)抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白 0.2ml

小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit特價(jià)供應

小鼠Slit2 ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Mouse Slit2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Mouse Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-BSEP 膽汁酸鹽輸出泵蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDZD8 PDZ結構域PDZK8蛋白 規格 0.2ml

Cyclin G2 英文名稱(chēng): 周期素G2 0.1ml

Anti-CHK2 細胞周期檢測點(diǎn)激酶2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

STBM human 合體滋養細胞微絨毛膜Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CYP2C9 細胞色素P450 2C9Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NFAT1/NFATc2 核因子活化T細胞胞漿蛋白2 規格 0.1ml

Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit 人小表皮粘蛋白 96T

phospho-TIRAP(Tyr86) 英文名稱(chēng): 磷酸化白細胞介素1受體銜接蛋白 0.1ml

 


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