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大鼠腦星形膠質(zhì)細胞
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:5×105 cells/瓶
  • 貨號:LZ-YX9650
  • 價(jià)格: ¥3300/株
  • 發(fā)布日期: 2022-10-14
  • 更新日期: 2024-07-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZ-YX9650
用途 僅供科研實(shí)驗
組織來(lái)源
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
是否是腫瘤細胞
規格 5×105 cells/瓶
保質(zhì)期 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
器官來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
免疫類(lèi)型 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
品系 原代細胞
生長(cháng)狀態(tài) 貼壁
物種來(lái)源 大鼠源 
是否進(jìn)口

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng) 產(chǎn)品規格
貨號
大鼠腦星形膠質(zhì)細胞
5×105細胞數
LZ-YX9650


產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠腦星形膠質(zhì)細胞

規格:T25瓶或者1mL凍存管

細胞特性

1) 來(lái)源:腦

2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長(cháng)

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上,可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。

3) 含量:>1x10^6  細胞數

4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上,可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞,請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。  收到細胞后 次傳代建議T25培養瓶12傳代 。

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM(推薦iCell-0001)培養基; 胎牛血清,10%;雙抗1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二.細胞處理:

1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過(guò)夜。 天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力,后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。




注意事項:
1. 收到細胞后首先觀(guān)察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū),了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 請客戶(hù)用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶?jì)榷嘤嗟呐囵B基可收集備用,細胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件;建議使用完全培養基。
4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài)。
5. 該細胞只能用于科研。
細胞培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過(guò)夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過(guò)夜)。 天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。 
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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